2023年3月，南京大学生命科学学院闫超教授、陈迪俊教授联合南京鼓楼医院刘翔宇主任团队在Nature Neuroscience在线发表题为“Lipid-accumulated reactive astrocytes promote disease progression in epilepsy”的研究论文。该研究采用集萃ob电竞官网入口  B6/JGpt-Apoeem1Cd82/Gpt、B6/JGpt-Apoeem1Cflox/Gpt-Aldh1l1em1Cin(CreERT2)/Gpt小鼠，首次报道了一种脂质堆积的反应性星形胶质细胞（LARA）在癫痫病发病中的重要作用以及致病机理，揭示了LARA以APOE依赖的方式形成，加剧神经元的过度兴奋，促进癫痫病发展进程，为耐药TLE治疗提供新思路。

1、颞叶癫痫患者及癫痫病小鼠模型脑内脂质异常积聚

研发者1介绍了4位抗药性TLE（最经常见到的局灶性癲痫组织形式）病员核磁震荡波谱数据表格表明了，与日常侧相信，TLE病员致痫侧中验测到脂质表现凸显曾加，表面脂质在癲痫脑中异常情况累积。下面来，研发者利用抗体荧光固色同时脂质组学介绍的方式表明了在抗药性TLE病员的神经系统元和星形胶质体细胞中脂质沉积关卡不错曾加。

随即完成向小鼠的海马区及腹腔肌内注射海人酸（KA）帮助小鼠羊角风症模特，进而完成团体荧光复染、脂质组学定性分析同时电镜切块观看等方法步骤得知了羊角风症小鼠经常出现了了与TLE患有相似性的成果，即中枢神经元和星形胶质受损细胞核核中脂质经常出现了异常处理堆积，但在小胶质受损细胞核核或是少突胶质受损细胞核核并如果没有。

和鼠的动态数据均表面，大脑皮层中脂质的过快聚集是癫娴的的非常重要病理报告表现形式（图1）。

图1.癫痫症患有和小鼠型号的异常情况脂质累积

2、单线程RNA测序反映颞叶朋友星形胶质神经元的脂质新陈代谢非常和APOE上涨

为了能够探究性系统异常的脂沉积能不能会导至脂分泌各种相应DNA遗传的表答变迁，实践者应用TLE病员（n=4）和非TLE较（n=4）的脑皮层样版做了单线程RNA测序（snRNA-seq），研究知道TLE实践组的脂质运送公司各种相应和分泌各种相应通道在星形胶质体受损细胞中被显得修改密码，在脑神经元被规模经营修改密码；进步骤的距离表答研究知道，TLE病员脂质运送公司DNA遗传APOE（编写代码载脂血清E）在星形胶质体受损细胞中正相关高表答。

这样动态数据反映出，颞叶病患星形胶质神经细胞的脂质基础代谢不正确，并判别APOE是进行此种过程中的重点什么是基因（图2a）。

图2.四核cpuRNA测序论述颞叶人群星形胶质細胞的脂质消化吸收系统异常和APOE调整

3、APOE介导脂质从神经元到星形胶质细胞的转移

方便探索APOE高形容是否能够是星形胶质内部脂质囤积的必要性环境，探究者首要对APOE−/−小鼠打瘦脸针KA引诱癫痫症，并评估方法了释放KA促使后21dAPOE敲除小鼠海马区脂质凝聚的转化。数据感觉，KA促使仅轻度影向了APOE−/−小鼠海马区周围神经系统元脂滴（LDs）的转变成；而海马区星形胶质内部的脂质凝聚在非常大的地步上被阻隔，证实APOE是星形胶质内部脂质凝聚所一定的，并不是周围神经系统元中的脂质囤积所一定的。

图3.是癫痫症小鼠星形胶质神经元脂质聚积还要APOE

对于上面后果，钻研者选用，在慢性型癜痫先决条件下，脂质开始在运动神经元中积累了，第二凭借APOE根据性原则长期转交到星形胶质内部。

为了能证实这样假如说，的学术研究应当大力开展了离体實驗。将野外型或APOE−/−小鼠的原代海马中枢中枢脑神经元和星形胶质中枢脑神经人体内部系离体共教育培养。知道KA畅快是可以引导中枢中枢脑神经元优化修改密码最终得以减少多余脂肪酸（FAs），减少的FAs会被即将来临的星形胶质中枢脑神经人体内部系消除，会造成星形胶质中枢脑神经人体内部系内脂质优化靠积蓄；而当增加KA畅快APOE−/−小鼠中枢中枢脑神经元中枢脑神经人体内部系时，星形胶质中枢脑神经人体内部系中仅关察到较低的脂质积少成多水平面（图3）。

反驳来，研究方案者能够将ALDH1L1-CreERT2小鼠与APOE flox小鼠混种杂交，实在星形胶质受损神经末梢元中 特情人敲除APOE。在KA激刺下APOE先决条件性敲除鼠表演出星形胶质受损神经末梢元钟LDs积累作文更多显著性增多，而神经末梢元的脂质积累作文更多的水平如果没有严重转变 。

然而，这样数据源揭示，在癫痫病状况下，APOE介导脂质从运动神经元向星形胶质上皮细胞的自主的装运（图4）。

图4.星形胶质内部特喜欢的人敲除APOE阻隔癜痫小鼠星形胶质内部脂质聚积

4、颞叶癫痫患者反应性星形胶质细胞的分子谱分析

那么好这群高呈现APOE还有脂问题堆放的星形胶质細胞能否是这种不同的星形胶质細胞亚群？

探析者标准比组和TLE朋友的单核心RNA测序提取数据统计将星形胶质组织系群体心理分类四个亚群，分折表明，但其中A4亚群既突出表面出脂质代谢率和集运对应遗传DNA的偏态高表现方式方式，互相也突出表面出较高的APOE表现方式方式水平方向；还，在对四个组织系亚群的标出遗传DNA的表现方式方式摸式分折表明，A4亚群现实存在独立性于某些亚群的转录组显著特点，都是种不一样的组织系亚型，探析者将其起名为LARA（图5）。

图5.载脂球蛋白E介导脂质聚积发应性星形胶质体细胞的进行

5、APOE是脂质掌握反馈性星形胶质肿瘤细胞构成所须得的

如此LARA与高表示的APOE期间产生什么东西结合呢？论述者现在来探测了天然的型、APOE−/−小鼠海马区的LARA有关的什么是染色体的表示，出现7几个被检什么是染色体中含6五个什么是染色体在KA促进后突出表现形式出为显著变幻，而在这里6五个什么是染色体中，又有5五个什么是染色体被KA促进上涨并被APOE敲除仰制，10个什么是染色体突出表现形式出反之的方式。这样的统计资料表面，APOE是引响LARA有关的什么是染色体表示的关键所在因素，是LARA产生的一定先决条件（图5g）。

6、脂质聚集的反馈性星形胶质组织与颠痫小鼠的颠痫主题活动有关系

接下去来，研发者对LARA在颞叶性癫娴中的性能表型对其进行了探索。显示与KA刺激功用的野外型小鼠相比之下，无所谓是APOE KO还是要星形胶质癌细胞特情人敲除APOE均能解决颞叶性癫娴小鼠的癫娴出现问题多次和持续性用时。證明了APOE介导的脂质运送在促癫娴中发挥功用重要性功用，还是因为LARA造成根据于APOE，进两步代表LARA存在促癫娴功用（图6）。

图6.脂质症瘕的反應性星形胶质体细胞与是颠娴症小鼠的是颠娴症活动组织业内

7、脂质日常积累的体现性星形胶质上皮细胞核经由星形胶质上皮细胞核A2AR有利于癫痫症活動

那么LARA是通过何种分子机制来调控、促进癫痫病发病呢？研究者通过使用游离FAs处理野生型或APOE^−/−小鼠的原代星形胶质细胞，在体外模拟LARA的形成。采用RNA-seq分析发现FAs能够显著诱导腺苷2A受体（A_2AR）表达上调，并且这种上调能够被APOE KO所阻断，同时，这一结果在KA诱导的癫痫小鼠海马区的免疫荧光分析结果中得到了进一步证实。

接下来为了进一步验证A_2AR在促癫痫中的作用，研究者构建了AAV-A_2AR-shRNA-eGFP小鼠模型实现在星形胶质细胞中 特异性敲低A_2AR，当施加KA刺激后，与A_2AR敲低星形胶质细胞相邻的海马区神经元兴奋性和神经传递显著降低，从而显著降低了KA诱导的癫痫发作活性。

另外，研究者通过外源施加A_2AR拮抗剂ZM241385抑制A_2AR的表达，结果发现抑制A_2AR的表达确实能够显著降低癫痫发作活性。这些结果表明，腺苷2A受体（A_2AR）在LARA介导的神经毒性中发挥着核心作用。

图7.脂质积淀表现性星形胶质細胞经由A2AR加快羊角风小鼠的羊角风活動

本调查感觉，在颞叶羊癫疯（TLE）求美者和羊癫疯小鼠型号中，星形胶质肿瘤脑神经元导致过度紧张的脂质积累会从而导致脂质积累反映性星形胶质肿瘤脑神经元（LARA）的建立，LARA会使得脑神经元导致过度紧张月活并提速羊癫疯病的发展进步的进程。并且呈现了LARA的建立大部分依赖性于APOE的高形容，敲除APOE染色体可有效率调节羊癫疯小鼠LARA的建立和羊癫疯发生抗逆性。

本研究分析本次看到好几个种最新上线的星形胶质人体细胞核膜--LARA，并深入的表明了LARA使得羊癫疯病症成长 进度的氧分子逻辑，多样化了员工关于星形胶质人体细胞核膜方面的问题模块的能够理解，为靶点星形胶质人体细胞核膜治療中成药难治性羊癫疯打下前提了实际前提。