图1. 新型抗体 - 药物偶联物（ADCs）的主要特征及其对未来药物研发的潜在意义^[1]

案例分享一：抗原理解

目的：评估8种细胞系中c-Met和HER2的表面表达情况，以确定其是否适合作为ADC的靶向对象。

方法：流式细胞术分析。

结果：c-Met和HER2在肿瘤细胞中广泛分布，这为双靶点ADC或联合疗法提升癌症治疗效果提供了良好潜力。

图2. 8种神经细胞系中HER2和c-Met的接触面表达爱

案例二：细胞结合试验

目的：评估ABBV-399（c-Met ADC药物）与肿瘤细胞上c-Met的结合亲和力。

方法：流式细胞术分析。

结果：ABBV-399对所有三种肿瘤细胞系均显示出结合能力，其结合特征与Telisotuzumab（c-Met抗体）相似。

图3. ABBV-399在其他癌受损细胞系中的切合实验

案例分析三：人体细胞毒素经过多次实验发现

目的：筛选多种肿瘤细胞系，找出对ABBV-399介导的细胞毒性高度敏感的细胞系。

方法：CellTiter-Glo（CTG）试验。

结果：ABBV-399对四种肿瘤细胞系表现出强效的细胞毒性，其疗效与c-Met过表达水平密切相关。值得注意的是，在SNU-5细胞系中，与游离的细胞毒性有效载荷（MMAE）相比，ABBV-399展现出显著更强的抗增殖作用。

图4. ABBV-399对肿癌体细胞系的量效弧线

表 1. 肿癌内部体内c-Met把你想表达出来及对ABBV-399的敏各样性

案例分享四：内吞的功效

目的：使用pH敏感型荧光染料pHrodo™评估ABBV-399细胞水平内吞作用。

方法：流式细胞术分析。

结果：ABBV-399与Telisotuzumab表现出相似的内化效果，且内化比例与时间呈正相关。在c-Met阳性的NCI-H1650细胞中检测到较低的内化信号，这或许能解释ABBV-399与该细胞结合却未发挥细胞毒性的现象。

图5. ABBV-399的内化趋势学

真实案例五：癌细胞时间间隔和凋亡实验设计

目的：评估DS-8201a对靶细胞SK-BR-3细胞周期和凋亡的影响。

方法：流式细胞术分析。

结果：处理48小时后，与对照组相比，DS-8201a组S期细胞比例显著增加，有效载荷通过抑制拓扑异构酶I使细胞周期停滞在S期（图 6）。与对照组相比，DS-8201a组凋亡细胞比例显著上升，有效载荷可通过细胞周期依赖或非依赖的方式诱导细胞凋亡（图 7）。

图6. 不一样氧浓度DS-8201a对靶组织细胞核SK-BR-3组织细胞核周期时间的关系

图7. 差异含量DS-8201a在靶癌细胞SK-BR-3中帮助的凋亡

案例六：体外共接种条件下的旁观者杀伤作用（流式细胞术，FACS）

目的：评估DS-8201a对HER2阳性和HER2低表达肿瘤细胞的旁观者效应。

方法：流式细胞术分析。

结果：DS-8201a对HER2阳性的SK-BR-3细胞具有直接细胞毒性，且在共培养中对抗原阴性的MDA-MB-468细胞表现出旁观者杀伤效应。

图8. ABBV-399的身体知情者者杀伤力滞后效应

（a）流式神经人体细胞神经人体细胞术的团队浅析（b）DS-8201a工作后能活的SK-BR-3和MDA-MB-468神经人体细胞总数量

案例七：体外共接种条件下的旁观者杀伤作用（荧光素酶报告细胞）

目的：将不同水平c-Met表达的SNU-5细胞（ADC靶细胞）与c-Met低表达的荧光素酶阳性细胞（报告细胞，A549-NSCLC和NCI-H82-SCLC）以2:1的比例混合，并用ABBV-399处理。孵育6天后，测定荧光素酶活性以评估报告细胞情况，测定CTG活性以评估SNU-5细胞情况。

方法：荧光素酶报告细胞和CTG试验。

结果：在SNU-5（c-Met表达细胞）与A549-luc或NCI-H82-luc报告细胞（均为c-MET低表达）的共接种体系中，ABBV-399以浓度依赖的方式降低了报告细胞混合物的活力。这表明 ABBV-399介导了浓度依赖的旁观者杀伤效应。

图9. ABBV-399的身体外观战者破坏相应

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